Hoe werk Gibson-kloning?
Hoe werk Gibson-kloning?

Video: Hoe werk Gibson-kloning?

Video: Hoe werk Gibson-kloning?
Video: How to Simulate Gibson Assembly 2024, November
Anonim

Die Gibson Kloning Master Mix bestaan uit drie verskillende ensieme binne 'n enkele buffer. Elke ensiem het 'n spesifieke en unieke funksie vir die reaksie: T5 Eksonuklease - skep enkelstring DNA 3' oorhange deur terug te kou van die DNA 5' einde. Komplementêre DNA-fragmente kan vervolgens aan mekaar uitgloei.

As u dit in ag neem, hoe werk Gibson?

Die Gibson Assembly®-metode is 'n kloningsprosedure wat die kloning van twee of meer fragmente moontlik maak sonder die behoefte aan beperkingsensiemvertering of versoenbare beperkingsplekke. In plaas daarvan word gebruikergedefinieerde oorvleuelende punte in die fragmente ingesluit om die naatlose aansluiting van aangrensende fragmente moontlik te maak.

Net so, wat is in Gibson Assembly Master Mix? Die Gibson Cloning Master Mix bestaan uit drie verskillende ensieme binne 'n enkele buffer. Elke ensiem het 'n spesifieke en unieke funksie vir die reaksie: T5 Eksonuklease - skep enkelstring DNA 3' oorhange deur terug te kou van die DNA 5' einde. Komplementêre DNA-fragmente kan vervolgens aan mekaar uitgloei.

Op hierdie manier, hoe werk Golden Gate-samestelling?

Golden Gate kloning of Golden Gate vergadering is 'n molekulêre kloningsmetode wat 'n navorser toelaat om gelyktydig en rigtinggewend veelvuldige DNA-fragmente in 'n enkele stuk saam te stel deur gebruik te maak van Tipe IIs-beperkingsensieme en T4 DNA-ligase. Hierdie samestelling is in vitro uitgevoer.

Hoe werk Gateway-kloning?

Die GATEWAY Kloning Tegnologie is gebaseer op die plekspesifieke rekombinasiestelsel wat deur faag l gebruik word om sy DNA in die E te integreer. Die attL- en attR-plekke rondom die ingevoegde faag-DNA rekombineer plekspesifiek tydens die uitsnygebeurtenis om die attP-plek in faag l en die attB-werf in die E.

Aanbeveel: