Hoe werk die DNA -volgorde van Sanger?
Hoe werk die DNA -volgorde van Sanger?

Video: Hoe werk die DNA -volgorde van Sanger?

Video: Hoe werk die DNA -volgorde van Sanger?
Video: Sanger sequencing 2024, November
Anonim

Sanger-volgordebepaling lei tot die vorming van verlengingsprodukte van verskillende lengtes, beëindig met dideoxynucleotides aan die 3' -einde. Die verlengingsprodukte word dan geskei deur Kapillêre Elektroforese of CE. Die molekules word deur 'n elektriese stroom ingespuit in 'n lang glas kapillêr gevul met 'n gelpolimeer.

Op hierdie manier, wat is die Sanger -metode van DNA -volgordebepaling?

Sanger volgorde , ook bekend as die kettingbeëindiging metode , is 'n tegniek vir DNA-volgordebepaling gebaseer op die selektiewe inkorporering van kettingterminerende dideoxynucleotides (ddNTPs) deur DNA polimerase tydens in vitro DNA replikasie. Dit is ontwikkel deur Frederick Sanger en kollegas in 1977.

Ook, hoe werk kettingbeëindiging-volgorde? Sanger DNA volgorde staan ook bekend as die ketting - beëindiging metode van volgorde . ddNTP's lei tot beëindiging van die DNA-string omdat ddNTP's nie die 3'-OH-groep benodig vir fosfodiesterbindingsvorming tussen nukleotiede nie. Sonder hierdie band, die ketting van nukleotiede wat gevorm word, is beëindig.

Eenvoudig so, waarom doen ons Sanger -volgorde?

Sanger-volgorde is a metode van DNA-volgordebepaling gebaseer op die selektiewe inkorporering van kettingterminerende dideoxynucleotides deur DNA polimerase tydens in vitro DNA replikasie. Dit het steeds die voordeel bo kortlees volgorde tegnologie (soos Illumina) dat dit kan produseer DNA-volgorde lees van> 500 nukleotiede.

Is die volgorde van Sanger akkuraat?

Sanger-volgordebepaling met 99.99% akkuraatheid is die "goue standaard" vir kliniese navorsing volgorde . Nuwer NGS-tegnologieë word egter ook algemeen in kliniese navorsingslaboratoriums as gevolg van hul hoër deursetvermoë en laer koste per monster.

Aanbeveel: