INHOUDSOPGAWE:

Hoe kies jy klone?
Hoe kies jy klone?

Video: Hoe kies jy klone?

Video: Hoe kies jy klone?
Video: КАКОЙ ВЫБРАТЬ ФИЛЬТР ДЛЯ ВОДЫ? Обратный осмос. 2024, November
Anonim

Wanneer kies a kloon , maak seker dat die wortels sterk, wit is en gretig uit die groeimedium uitsteek. As die wortels bruin en verskrompel is, of andersins onaktief lyk, sit dit terug en soek 'n beter een.

Buitendien, hoe kloon jy 'n enkele sel?

  1. Tel die selle om ~16 000 selle in die eerste put (A1) van 'n 96-put plaat wat 200 µL medium bevat, te plaas.
  2. Verwyder 100 µL uit A1-bevattende selle en meng met B1, pipeteer 3x op en af om goed te meng voordat 100 µL verwyder word en met C1 gemeng word, ens.

Ook, hoe kies jy 'n soogdierselkolonie? Plaas die bord onder die mikroskoop om ongedifferensieerde gesonde te kies kolonies . Kies kolonies gebruik 'n P-20 pipet wat op 10ul gestel is. Versigtig kies a kolonie sonder om die op te breek kolonie in enkeling selle , en plaas dit in 'n 96-put bord met tripsien. Pipetteer 'n paar keer op en af om die te versprei kolonie.

Dienooreenkomstig, hoe gebruik jy 'n kloonsilinder?

Met behulp van steriele medium tang, haal a kloning silinder . Druk liggies die plat onderkant van die silinder in die gladde silikoonvet en verwyder met 'n skielike vertikale beweging. As dit behoorlik gedoen word, sal dit eweredige verspreiding van vet aan die onderkant van die silinder . Stel die silinder oor 'n kolonie.

Hoe kies jy kolonies vir stabiele sellyne?

Die protokol vir die generering van stabiele sellyne vereis verskeie stappe soos hieronder getoon:

  1. Genereer 'n doodskurwe om die optimale seleksie-antibiotikakonsentrasie te bepaal.
  2. Transfekteer selle met verlangde plasmiedkonstruk(te)
  3. Kies en brei stabiele poliklonale kolonies uit.
  4. Identifiseer enkele klone deur beperkte verdunning en uitbreiding.

Aanbeveel: